
实验数据(悬浮细胞转染protocol)
在250ml摇瓶中培养50ml细胞——
1. 转染前2-3小时,种细胞密度在1.0x106 cells/ml。
2. 制备Transporter 5-DNA转染复合物(添加顺序非常重要):
2.1 在EP管中加入2.5ml稀释剂,加入50ug质粒DNA;
2.2 简单混合/涡旋振荡;
2.3 向混合溶液中加入200ul Transporter 5;
2.4 涡旋5秒钟;
2.5 静置溶液20分钟,以便形成Transporter 5-DNA复合物;
2.6 用移液器轻轻吹打3次进行混合。
3. 将转染试剂-DNA混合物加入25ml细胞悬液中;
4. 将细胞悬液放入培养箱中继续培养。
5. 培养2-3小时后,加入25ml新鲜培养基,继续放入培养箱进行培养。
6. 一般而言,转染36-48小时后即可检测到重组蛋白表达,表达高峰通常在转染后72-96小时出现。
其他转染体系参考——

参见:https://www.polysciences.com/default/transporter-5-transfection-reagent
订购信息
货号 | 描述 | 规格 | 储存条件 | 使用建议 |
26008-5 | Transporter 5 Transfection Reagent | 5ml | 4℃ | 可用于1-1.25L悬浮细胞转染 |
26008-50 | Transporter 5 Transfection Reagent | 50ml | 4℃ | 可用于10-12.5L悬浮细胞转染 |