PEI MAX - Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride (MW 40,000)


是线性聚乙烯亚胺盐酸盐形式,是线性化聚乙烯亚胺PEI 25K的升级产品。与PEI 25K相比,PEI MAX 40K有如下有点:


1.完全水解(去乙酰化),批间差更小,批间一致性优于PEI 25K;

2.盐酸盐形式,具更高的水溶特性,能在两个小时内转化为即用型溶液;

3.含更长连续性乙烯亚胺片段,其质子化氮水平比PEI 25K提高11%以上,转染效率更优。



CAS号

 49553-93-7

分子式

(C2H5N)n ● xHCl

分子量

40000

外观

白色或灰白色自由流动固体

储存

室温

结构式

PEI MAX

溶解性

溶于低温和室温水;不溶于常用有机溶剂(乙醇,丙酮,四氢呋喃)


聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine,PEI),是一种阳离子高分子聚合物,——有较高阳离子电荷密度的有机大分子。它每第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得该聚合物在任何pH下都能充当有效的质子海绵体。它能将DNA缩合成带正电荷的微粒,这些微粒可以黏合到带有负电荷的细胞表面残基,并通过胞吞作用进入细胞。聚合物进入细胞后,胺的质子化导致反离子大量涌入以及渗透势降低,上述变化导致的渗透膨胀使囊泡释放聚合物与DNA形成的复合物进入细胞质,复合物拆解后,DNA就能自由的融合到细胞核中。PEI是历史上继多聚赖氨酸之后发现的第二种聚合物转染试剂。

聚乙烯亚胺有线性支链两种,有多种分子量可选,实验证明线性和支链都具有转染效果,而广泛使用的分子量25kDa的线性PEI具有较高的转染效率。后期科研人员又对该分子进行了优化,对其分子进行了修饰,制出了分子量为40kDa的线性PEI MAX,使其溶解性显著提高,转染效率更高,细胞毒性更低。由于结构的差异,PEI MAX 40k比PEI 25k有明显优势。PEI 25k转染溶液通常需要几个小时才能制备,而PEI MAX 40k可以在两个小时内转化为即用型溶液。而PEI 25k含有4-11%的残余丙酰基,可防止聚合物主链与DNA强烈结合。PEI MAX 40k完全去乙酰化的结构意味着每批产品的表现始终如一。

线性PEI广泛适用于常见细胞系,如:HEK-293、HEK293T、Hep G2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、HIH/3T3和sf9等,PEI即使在有血清存在的情况下仍然能够高效的将核酸导入细胞,其具有优越的转染效率,重组蛋白的高表达水平,且与含血清的培养基相兼容,低细胞毒性,PEI的另外一个显著优势是较其他转染试剂使用成本极低。

 

配置方法

1. 在1L玻璃烧杯中,将1g PEI MAX 40k悬浮于900ml水中;

2. 在1L玻璃烧杯中加入涂有聚四氟乙烯的搅拌棒,设定合适搅拌速率,开始搅拌;

3. 待PEI MAX 40k完全溶解,一般为5分钟内;

4. 用1N氢氧化钠和1N盐酸调节溶液的pH,到pH值为6.90至7.10;

5. 将溶液从1L玻璃烧杯倒入1L量筒,并向1L量筒中加水定容至1L;

6. 使用真空膜过滤,并分装成合适的小份,4℃保存。

 

保存方法

未经配置的粉末有效期为2年;

配置成液体分装在合适的瓶子中,置于4℃保存,有效期可达6个月。

 

实验数据


PEI MAX

 

对培养在50ml Gibco Freestyle中的1x106 cells/ml的HEK293细胞进行IgG64质粒转染,PEI:DNA=4:1。转染120hr后取样,并用Easy-Titer Human IgG(H+L)Assay Kit(Thermofisher #23310)进行定量。N=4,Error bar=SD。

(参考https://www.polysciences.com/default/polyethylenimine-max-mw40000-high-potency-linear-peihttp://www.mine-bio.com/productDetail.html?id=56983363&url=brandDetail

 

订购信息


货号

描述

规格

储存条件

使用建议

24765-1

Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride (MW 40,000)

1g

4℃

可配置1L溶液,约可用于250L细胞转染(以悬浮细胞为例)



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