BestoFectamine Transfection Reagent是一款高效阳离子脂质体转染试剂，通过与质粒或其他形式的核酸结合并形成脂质体微粒，与细胞膜融合而进入细胞。该转染试剂的优势之一在于伴随核酸进入细胞过程中，把对细胞的损害降到最低，提高转染阳性细胞存活率及蛋白表达量。经过一系列优化摸索，BestoFectamine更适用于悬浮细胞体系（如CHO、293等）的瞬转蛋白表达环节。

保存条件

2-8℃保存，有效期12个月。

转染体系

转染条件需要根据不同的细胞类型进行优化，以下供参考：

效果比较

数据1：不同转染试剂在ExpiCHOs细胞中Day5和Day7的表达量对比。在10ml的ExpiCHOs培养体系中，转染前一天接种4 x 10^6 cells，转染用10ug质粒，且质粒与转染试剂比都为1:4。分别用4种转染试剂得到Day 5和Day 7表达量数据（其中，PEI_1和PEI_2是市场上两个品牌的产品，BTB是本产品，EC是T品牌配套试剂）。

数据2：5种序列抗体用ExpiCHOs细胞，分别用BTB及EC转染试剂在Day 9的表达量对比。在10ml的ExpiCHOs培养体系中，转染前一天接种6 x 10^6 cells，转染用20ug质粒，且质粒与转染试剂比都为1:4。5种不同抗体分别用BTB和EC转染试剂转染Day 9的表达量（其中，BTB是本产品，EC是T品牌配套试剂）。

转染步骤

ExpiCHO转染——

1. 转染前一天，用新鲜培养基将细胞传代至密度3-4 x10^6 cells/ml，置于摇床上培养过夜。

2. 转染当天，检测细胞密度及活率，细胞密度应在7-10 x10^6 cells/ml之间，细胞活率应大于95%。

3. 用37℃预热好的新鲜培养基，将细胞培养液稀释至6 x10^6 cells/ml，并混匀。

4. 制备BestoFectamine/质粒复合物：

1） 将BestoFectamine转染试剂颠倒4-5次混匀。

2） 用Opti-MEM将质粒和BestoFectamine转染试剂分别稀释（如30mL规模的转染，分别将30ug质粒和120ul的BestoFectamine转染试剂用1mL的Opti-MEM稀释）混匀并静止5分钟。

3） 将稀释的转染试剂与质粒混合，颠倒5-6次混匀。

5. 将BestoFectamine/质粒复合物室温放置10-20分钟后缓缓滴加到稀释好的细胞中。

6. 转染后的细胞置于37℃，8% CO2的摇床中培养。

7. 转染20小时后根据情况添加补料，培养5-7天后进行收获。

Expi293转染——

1. 转染前一天，用新鲜培养基将细胞传代至密度2.5-3 x10^6 cells/ml，置于摇床上培养过夜。

2. 转染当天，检测细胞密度及活率，细胞密度应在4.5 -5.5 x10^6 cells/ml之间，细胞活率应大于95%。

3. 用37℃预热好的新鲜培养基，将细胞培养液稀释至3 x10^6 cells/ml，并混匀。

4. 制备BestoFectamine/质粒复合物：

1) 将BestoFectamine转染试剂颠倒4-5次混匀。

2) 用Opti-MEM将质粒和BestoFectamine转染试剂分别稀释（如30mL规模的转染，分别将30ug质粒和120ul的BestoFectamine转染试剂用1mL的Opti-MEM稀释）混匀并静止5分钟。

3) 将稀释的转染试剂与质粒混合，颠倒5-6次混匀。

5. 将BestoFectamine/质粒复合物室温放置10-20分钟后缓缓滴加到稀释好的细胞中。

6. 转染后的细胞置于37℃，8% CO2的摇床中培养。

7. 转染20小时后根据情况添加补料，培养5-7天后进行收获。

订购信息——